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点击次数:213 发布时间:2020-06-03

yuan代细胞培养是建议细胞系的di一步,dan是有很duoxiaohuo伴在yuan代细胞上就hui有很duoyihuo哦,主要有以xiaji大问ti,xiaobian都为大jia整理好咯,搬上你的xiao板凳,一起来看看!

 一、yuan代细胞与细胞系有什么qu别?

答:gen据chuan统定义,自组织di一次收获和jiezhong的细胞被称为yuan代细胞,zhe类细胞直jie从组织分离,生命周期有限,经数次chuan代后hui逐渐tingzhi生chang。yuan代细胞在有限的生命周期内需掌握好细胞的大生chang空间,襶uan3窒赴褐谢蛐秃捅硇偷囊粃hi性。

细胞系是不断生chang、分hua的细胞群,因其经过遗chuangai造,zhi使其具有无限增chang的潜能。体外生chang的细胞系用于医疗或科褁iaoⅫ/p>

dan实际上,经过chang时间、连续的chuan代培养后,细胞系随着代数的增加,细胞的基因型和表型都有可能发生gaibian。

需要zhi出的是,在不同的科研xiao组中zhe些shu语的定义hui有所不同。许duo研jiuyuan不用细胞系zhe个ci表shi细胞群,chufei细胞经过liao遗chuangai造。 

二、眃ui龊痛惺裁磓u别?

答:眃ui鍪桥嘌镏邢赴苁姆叮ǔJ莦hi细胞zhi数或dui数生chang期。代数是zhi细胞群从培养瓶中移出,chuan代培养过程的次数,chuan代培养的目的,是使细胞处于低密du以刺ji其jin一步生chang。 

 三、jie收到的冻存细胞该如何处理?

答:收到包装xiang后,立即将冻存细胞从ganbing移入液氮中冻存。此过程jin量快,襶uan苊馍隆2灰赴鹀hu存在-80℃,zhe样huidui细胞造成不可挽回的shang害。 

四、冻存的细胞该如何开shi培养?

答:主要分为以xia9点:

1.将一管细胞从液氮罐中取出,注yi保护手和眼睛。

2.将冻存管快速的放入37℃水浴中,轻轻握住并旋zhuan,直到管内物体完全融hua。

3.将冻存管立即从水浴中拿出,cagan,zhuan入无菌环jing。

4.用70%的酒精chong洗冻存管,然后ca去duo余酒精。

5.打开盖子,注yi蕑hong覆灰龅嚼锩娴膌uowen(注yi,由于冻存管有负压,开盖时可能hui有少量溢出,zhe是正常现象)。

6.用duoju赖氨酸(或can照shuo明书)包被培养瓶。duo数细胞推荐的jiezhong密du为每平fang厘米5000个细胞。

7.盖好培养瓶的盖子,轻轻摇晃培养瓶以使细胞穤hi季取H粜枰猶i体絟uan豢纱蚩亲印Ⅻ/p>

8.将培养瓶放入培养xiang中(37℃,5%CO2,95%空qi)

9.放入培养xiang后第6-16xiao蔮ei黨uan一次培养基,以去chu残liu的二甲基亚枫和未贴壁的细胞。 

wu、细胞培养过程中,duojiu更huan一次培养基?

zhe取决于细胞生chang的速du。一般而言2-3tian更huan一次培养基,许duo细胞培养实yanshi通常在周一,周三,周wu更huan培养基。

注yi:冻存细胞复苏后,在6-16xiao时内更huan培养基,以去chu残liu的二甲基亚枫和死亡的细胞。 

六、wo能扩增培养和zai次冻存yuan代正常人类细胞吗?

答:zhe取决于细胞的类型。一些细胞类型xiang神经细胞,神经胶质细胞和一些生chang缓man的上皮细胞,不推荐扩增培养和zai次冻存。其它的细胞类型xiang成feng亿娱乐网zhi细胞、xing形细胞、肾系膜细胞、xing形胶质细胞等等,可以扩增培养和zai次冻存。

然而,需要注yi的是zai次冻存的过程可能导zhi细胞生chang性能的gaibian。

七、培养瓶中应该加入duo少体积的培养基?

答:wo们推荐的用量为:T-25培养瓶5ml,T-75培养瓶15ml,T-150培养瓶30ml。

 

    

 
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